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              代谢通路组装服务

              微生物可以用来生产一些可再生性化学物质随着当今生物技术特别是代谢工程和合成生物学的迅猛发展调节代谢通路(metabolic pathway)大大地推进了工业界以微生物为平台的产品生产。然而在代谢工程通路调节中通路中酶的表达不平衡会导致有毒中间产物的积累影响细胞的生长进而导致目标产物的产量下降。因此平衡各个酶的活性和表达水平是优化通路的关键所在。

              当前对于通路的调节绝大部分都局限于针对某一个因子同时调节多因子鲜有报道其瓶颈在于多基因组装的难度。近年来发展起来的DNA组装技术绝大部分方法适用于单基因或者两个基因的操作且在一定程度上受限于PCR扩增的能力;同时在一些较长片段的PCR扩增中通常会带来一些不必要的突变。虽然引入条码序列可以避免PCR的弊端却增加了工作量和成本。

              因而一种免PCR反应免条码序列的DNA组装技术的开发显得尤为重要,通过实现通量的组装,进而通量优化通路,大大地提高代谢工程通路优化的效率。金斯瑞全新的DNA组装技术可实现组合优化代谢通路的目的并隆重推出“代谢通路组装服务”。该技术可以同时优化多个基因的序列及表达从而移除代谢通路的瓶颈同时平衡多基因的表达。我们提供基因合成到载体文库构建的一站式服务发货质粒文库可以直接用于后期实验的筛选。

              服务内容

              研究策略
              服务内容
              交付结果
              询价
              随机设计
              代谢通路组装 - 交付质粒 Cat. No. SC1702
              • 单个质粒且每个质粒为4 µg
              • 价格及周期需依据序列长度复杂程度及所需质粒的数量而定
              文库筛选
              代谢通路组装 - 交付文库 Cat. No. SC1707
              • 10 µg质粒混合库
              • 价格及周期需依据序列长度复杂程度库容及验证需求(如酶切分析测序验证文库序列准确性及多样性等)而定

              代谢通路优化流程

              代谢通路优化策略

              通过调节酶的表达来实现通路优化可以从以下四个层面进行:

              1. 通过替换载体上复制原点来改变基因拷贝数
              2. 通过改变一些调节元件(如启动子核糖体结合位点等)来调节基因的表达水平;
              3. 通过改变细菌操纵子中基因的排列顺序
              4. 通过选择来自不同物种的基因从而改变酶动力学特性和底物的特异性。

              代谢工程相关文献

              • Kallio et al. An engineered pathway for the biosynthesis of renewable propane. Nat Commun. 2014 Sep 2;5:4731. Free Full Text
              • Xu et al. Improving fatty acids production by engineering dynamic pathway regulation and metabolic control. Proc Natl Acad Sci U S A. 2014 Aug 5;111(31):11299-304. Free Full Text
              • Xue et al. Production of omega-3 eicosapentaenoic acid by metabolic engineering of Yarrowia lipolytica. Nat Biotechnol. 2013 Aug;31(8):734-40. Free Full Text
              • Nguyen et al. Redirection of metabolic flux for high levels of omega-7 monounsaturated fatty acid accumulation in camelina seeds. Plant Biotechnol J. 2014 Jul 26. doi: 10.1111/pbi.12233. Free Full Text

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